Esta aula propõe uma estratégia didática para a experimentação de química em escolas de ensino Médio, associando métodos de extração, efeito de detergentes, interações iônicas e solubilidade. No entanto, cabe ressaltar que, embora ilustrativo, o procedimento realizado proporciona a obtenção de uma quantidade de DNA impuro. A extração de DNA pode ser realizada a partir de outros alimentos como: cebola, kiwi, morango e fígado, utilizando-se procedimento semelhante.
MATERIAL
• 1 tomate
• Cloreto de sódio (4 g equivalente a 4 colheres de café)
• Água
• Etanol 96% (álcool etílico comercial; como alternativa pode ser utilizado também álcool de cereais (99%) encontrado em lojas de produtos para perfumaria e farmácias de manipulação)
• Detergente comercial (6 mL)
• Gelo (4 a 5 bandejas)
• Papel de filtro
• Bandeja plástica (para fazer banho de gelo)
• Faca
• Funil
• Béquer de 500 mL
• Béquer de 100 mL
• Termômetro
• Tubos de ensaio
• Tripé e tela de amianto
• Mixer ou liquidificador
Em um béquer de 500 mL, picar o tomate com uma faca e depois triturá-lo, utilizando um mixer durante 10 s.
Em um béquer de 100 mL, preparar a solução de lise: 6 mL de detergente concentrado, 4 g de cloreto de sódio, completando o volume com água até 60 mL.
Adicionar a solução de lise (60 mL) ao béquer de 500 mL contendo o tomate triturado.
Homogeneizar a solução de lise com a polpa de tomate e colocar o béquer em banho-maria
(55 °C) por 10 min, cuidando para que a solução não entre em fervura.
Preparar um banho de gelo em uma bandeja.
Após os 10 min de banho-maria, transferir o béquer para o banho de gelo por um período de 5 min.
Filtrar 4 mL da solução para um tubo de ensaio. Adicionar 4 mL de etanol gelado ao tubo de ensaio. Durante a adição do etanol, observar atentamente o que ocorre no tubo.
Figura : Etapas realizadas para a extração do DNA do tomate: a) processo de trituração; b) adição de solução de lise; c) aquecimento; d) choque térmico; e) filtração; f) separação de fases (adição de etanol gelado); e g) precipitação do DNA.
REFERÊNCIA
QUÍMICA NOVA NA ESCOLA Nº 25, MAIO 2007